++ ช่วยอธิบายหลักการ Purification แบบจับกับ his-tag หน่อยได้ไหมคะ ? ++

อยากทราบหลักการ และวัตถุประสงค์ ของการpurification แบบนี้อย่างเข้าใจง่ายๆน่ะค่ะ ?
แล้วการที่ his-tag อยู่ด้านหน้า กับด้านหลังยีนที่เราตัดต่อเข้าไป มันต่างกันยังไงคะ  ?


ถามแถมอีกนิดนะคะ
ในการ Expression ขั้นตอนการหา molecular weight เพื่อรันโปรตีนเราเทียบกับโปรตีนมาตรฐานด้วย SDS-PAGE
เราจำเป็นต้องมีลำดับเบสที่เป็น full lenght ไหมคะ
หรือเรามีแค่ DNA sequence ของยีนที่เราตัดต่อเข้าไปก็ได้คะ ?
(ถ้าได้ เราก็แค่เอา sequence ของเราไป convert ให้เป็น amino acid sequence ในพวกเว็บ expasy ใช่ไหมคะ
หลังจากนั้นก็เอา amino acid sequence ที่ได้ไปหา Molecular weight ในพวกเว็บ expasy อีกที ใช่ไหมคะ ?)


ขอบคุณค่ะ
แสดงความคิดเห็น
โปรดศึกษาและยอมรับนโยบายข้อมูลส่วนบุคคลก่อนเริ่มใช้งาน อ่านเพิ่มเติมได้ที่นี่