คือ การทดลองผมเป็นแบบนี้ครับ
ผมกำลังทำ Titration สารเคมี เพื่อหา acid dissociation constant (pka) โดย UV-vis spectoscopy technique
วิธีการก็คือ Titrate โดย acid titrant และ basic titrant เพื่อจาจุดที่ absorbance หรือ intensity คงที่... คือ add titrant แล้ว intensity (y-axis) ไม่เปลี่ยนแปลง
- Acetonitrile เป็น solvent
........................................
ปัญหาที่ผมเจอครับ ...
1. Baseline ไม่เป็น 0 (มากกว่า หรือ ติดลบ หรือบางที ไม่เป็นเส้นตรง เกิด bump เป็นระยะๆ)
ที่ผมคิดไว้ ปัญหาอาจจะเกิดจาก
1.1 ล้าง cuvettes ไม่สะอาด (ผมใช้ toluene ล้าง 3 รอบ.. เป่าแห้ง... ล้างด้วย solvent (acetonitrile) ... แล้วเอาเข้าไปอบใน oven 30 นาที เช็ดด้านนอกด้วยกระดาษเช็ดเลนส์
1.2 สารเคมี absorb แสง ก่อนที่จะเข้าสู่ UV-vis compartment (ซึ่ง ไม่น่าจะเป็นไปได้... อันนี้ไม่แน่ใจครับ)

2. เมื่อเริ่ม add สารเคมีที่ต้องการวัด ลงไป.. ผลปรากฎว่า spectrum ที่เกิดขึ้นตรงส่วนปลาย... มีค่าติดลบ (ต่ำกว่า 0 .. และแน่นอน ต่ำกว่า baseline) ซึ่งไม่น่าจะเกิดขึ้นได้ .. แต่ก็เกิดขึ้นหลายครั้งครับ ยิ่ง add titrant เพิ่ม ยิ่งต่ำลงเรื่อยๆ

ตอนนี้ผมได้ทดลองอ่านจากหลายๆ literature ก็ไม่ได้มีใคร mention ไว้... ขอความรบกวนทุกท่านที่มีประสบการณ์การใช้เครื่อง UV-vis ช่วยตรวจสอบดูหน่อยครับ ว่าผมทำช่วงไหนผิดพลาด

ปล. ขออภัยถ้าตั้งกระทู้ผิดห้องนะครับ
ขอบคุณครับ