ใครพอจะทราบการเกิดปฏิกิริยาของ Total phenolic content assay บ้างคะ

ที่เป็นวิธีหาปริมาณสารประกอบฟีนอลิกในสารสกัด โดยใช้ Folin-Ciocalteu reagent น่ะค่ะ
เรารู้แค่ว่า ต้องผสมมันกับ sodium carbonate แล้วพอเติมสารสกัดลงไป ถ้ามันมีสารฟีนอลิก ก็จะทำให้เกิดสารละลายสีน้ำเงินขึ้น
แต่เราไม่รูว่า มันไปเกิดปฏิกิริยายังไง เกิดเป็น product อะไรขึ้นมาถึงเกิดสีน้ำเงิน แล้วทำไมต้องเติมเบส
ตอนนี้หนักใจมาก ต้องทำรายงานส่ง ข้อมูลที่ชัดเจนหาไม่เจอเลย (มันไม่มีหรือหาไม่เก่งเองก็ไม่รู้ T^T)
ใครพอจะทราบ ช่วยอธิบายให้หน่อยได้มั้ยคะ หรือพอจะมี paper ที่เป็นข้อมูล กรุณาบอกเราด้วยเถอะค่ะ -/\-  นะ นะ
คำตอบที่ได้รับเลือกจากเจ้าของกระทู้
ความคิดเห็นที่ 1
เติมเบสให้ฟีนอลแตกตัวเป็นฟีนอเลทแอนไอออน
ไอออนนี้จะถูกออกซิเดชันได้ง่ายกว่าฟีนอลในรูปกรด และสามารถละลายในน้ำได้ดีกว่าในรูปกรดมาก

ตัวรีเอเจนท์พอไปออกซิไดซ์ฟีนอลแล้ว จะเปลี่ยนสภาพจากฟอสโฟทังสติกแอซิดและฟอสโฟโมลิปดิกแอซิด
ไปเป็นตะกอนแขวนลอยสีน้ำเงินเข้มที่เป็นของผสมระหว่าง W8O23 และ Mo8O23 ซึ่งดูดกลืนแสงสูงสุดที่ความยาวคลื่นราว 750nm
ทำให้ได้สีน้ำเงินเข้ม และมีปริมาณเป็นสัดส่วนสัมพันธ์กับฟีนอลที่เกิดรีดอกซ์กับตัวรีเอเจนท์ไป จึงใ้ช้หาปริมาณได้

ที่ต้องระวังคือสารที่เป็นตัวรีดิวซ์อื่นเช่น หมู่อัลดีไฮด์ในน้ำตาลอัลโดส (และอื่นๆ เช่นหมู่ซัลไฟต์อนินทรีย์)
ก็เกิดปฏิกิริยาแบบเดียวกันได้ อาจทำให้หาปริมาณฟีนอลได้มากกว่าจริง
แสดงความคิดเห็น
โปรดศึกษาและยอมรับนโยบายข้อมูลส่วนบุคคลก่อนเริ่มใช้งาน อ่านเพิ่มเติมได้ที่นี่